
多克隆抗體定制
- 多種屬
- 一站式
- 大規模
服務特色
金開瑞的多克隆抗體制備平臺,以抗體平臺為核心建立了一系列技術平臺和動物養殖基地,可以提供包括兔、小鼠、大鼠、羊等多個系統的多克隆抗體制備服務,供您自由選擇屬于您的特殊需求!
服務介紹
????多克隆抗體的制備是一種通過免疫宿主動物產生多個不同的抗體克隆的技術。它基于免疫系統的特性,通過免疫宿主動物對特定抗原的免疫刺激,誘導免疫細胞產生多樣性的抗體,以應對抗原的多樣性和復雜性。由于多克隆抗體具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點,被廣泛應用于免疫學診斷領域,經常用作WB實驗中的酶標二抗和ELISA實驗中的包被抗體。
????多克隆抗體存在于免疫動物的血清中,可通過直接分離血清獲得。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點,被廣泛應用于免疫學診斷領域,經常用作WB實驗中的酶標二抗和ELISA實驗中的包被抗體。
服務優勢
- 多樣性:多個抗體克隆,覆蓋多個抗原區域,提高抗原識別能力。
- 高特異性:精確識別目標抗原,減少非特異結合。
- 高親和力:強烈結合目標抗原,增強抗原-抗體作用。
- 靈活性:適用于多種應用,滿足不同研究需求。
- 容錯性:部分抗體失效時仍有其他克隆起作用,減少失敗風險。
- 成本效益:相對經濟實惠,一次實驗可獲得多個抗體克隆。
服務流程
客戶提供
重組蛋白:至少2-3 mg,蛋白純度大于90%,濃度不低于0.5 mg/mL,蛋白分子量大于10kDa;
多肽:裸肽1 mg,偶聯KLH/BSA/OVA或其他載體蛋白3-4 mg,裸肽純度大于90%,序列長度不少于10個AA;
病毒/細菌/膠條/天然蛋白等抗原類型請具體咨詢,另外也可選擇由金開瑞制備抗原。
最終交付
- 免疫前抗血清1 mL;免疫后抗血清12 mL/只,親和純化的抗體10-15 mg
- 備注:若選擇抗原親和層析純化,可提供1-5 mg純化抗體;
- 鑒定報告,包括免疫原序列、SDS-PAGE電泳圖譜、表達克隆測序報告、效價檢測ELISA結果,并根據客戶需求,提供抗體驗證結果,如WB、IHC、IP、IF等。
服務說明
| 服務編號 | 客戶提供 (抗原/信息) |
抗體純化方式 | 抗體類型 | 服務內容 | 服務周期 |
| JKR-pb001 | 抗原 | ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
抗原質控,動物免疫,ELISA/WB檢測, 采血,ProteinG/抗原親和純化,WB檢測 |
8-10周 |
| JKR-pb002 | 基因序列 (蛋白) |
ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
抗原分析及設計,全基因合成,表達質粒構建, 蛋白表達及純化,動物免疫,ELISA/WB檢測, 采血,ProteinG/抗原親和純化,WB檢測 |
20-24周 |
| JKR-pb003 | 基因序列 (多肽) |
ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
抗原分析及設計,多肽合成,載體偶聯, 偶聯物質控,動物免疫,ELISA/WB檢測, 采血,ProteinG/抗原親和純化 |
16-20周 |
| JKR-pb004 | 質粒模板 | ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
蛋白表達及純化,動物免疫,ELISA/WB檢測, 采血,ProteinG/抗原親和純化,WB檢測 |
16-20周 |
| JKR-pb005 | 小分子化合物 | ProteinA/G親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
半抗原偶聯載體,小分子偶聯物質控,動物免疫, ELISA檢測,采血,ProteinA/G親和純化 |
16-20周 |
| JKR-pb006 | 磷酸化/甲基化/乙酰化等修飾信息 | 抗原親和純化 | 修飾抗體 |
多肽合成(修飾/非修飾多肽),載體偶聯,動物免疫, ELISA/WB檢測,采血,抗原親和純化(修飾非修飾多肽) |
24-28周 |
案例展示
常見問題與解析 (Q&A)
多抗制備整個流程大致包括:(1)抗原制備;(2)動物免疫;(3)血清采集與檢測;(4)多抗純化與保存。
分子量大于10kDa,B純度>85%,濃度不低于0.5mg/ml,最好1–5mg/ml之間的可溶性蛋白。不應含有疊氮鈉、咪唑、尿素或其它有毒有害刺激性大的物質。甘油含量應低于20%。質量大于6mg 必須:A SDS-PAGE檢測圖,清楚標示樣品上樣量,Marker上樣量,和各自的濃度。 最好:C WB檢測圖
可以
(1)多肽是否偶聯載體,偶聯載體多肽:總量大于6-7mg,純度大于80%;濃度大于0.5mg/ml;未偶聯載體多肽總量大于10mg,純度大于90%;濃度大于0.5mg/ml (2)必須提供如下信息:A SDS-PAGE檢測圖,清楚標示樣品上樣量,Marker上樣量,和各自的濃度。
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一、多克隆抗體的制備流程及注意事項
1、抗原選擇:選擇適當的抗原作為免疫原。確保抗原具有較高的純度和活性,并能夠激發免疫響應。
2、免疫程序設計:確定免疫宿主動物、免疫時間表和劑量計劃。根據抗原的免疫性質,確定免疫的次數和間隔時間。注意選擇合適的免疫佐劑以增強免疫響應。
3、抗原免疫:將抗原與免疫佐劑混合后注射到免疫宿主動物體內,通常是通過皮下注射或腹腔注射。確保注射過程無菌,并根據動物的種類和重量調整注射劑量。
4、抗體檢測和篩選:收集免疫宿主動物的血清樣本,通過檢測抗體的特異性和親和力來篩選出高親和力的抗體。注意選擇合適的檢測方法和控制實驗條件,以確保篩選結果的準確性。
5、細胞融合和篩選:將免疫細胞與腫瘤細胞進行融合,生成雜交瘤細胞(hybridoma)。通過合適的篩選方法,如HAT選擇培養基,篩選出產生目標抗體的雜交瘤細胞株。注意細胞融合和篩選過程的無菌操作,并確保細胞培養條件的穩定性和適當的培養時間。
6、抗體生產和純化:將選定的雜交瘤細胞株進行擴增培養,產生大量的抗體。隨后,通過抗體純化技術,如蛋白A/G親和層析、蛋白L層析或親和層析柱等方法,從細胞培養上清中純化抗體。注意選擇適當的純化方法以確保抗體的純度和活性。
7、抗體驗證:對制備的多克隆抗體進行驗證和鑒定,確保其特異性和親和力。驗證的方法可以包括免疫組化、免疫印跡、流式細胞術等。注意使用適當的對照實驗和標準品進行驗證,并進行重復實驗以驗證結果的可靠性。
二、多克隆抗體的應用及重要性
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應用 |
描述 |
重要性 |
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免疫組化和免疫組織化學 |
檢測和定位蛋白在組織或細胞中的表達和分布 | 觀察和研究蛋白的定位、表達水平和功能 |
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免疫印跡 |
檢測和定量蛋白的存在、表達水平和修飾 | 研究蛋白的功能和相互作用 |
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FC流式細胞術 |
細胞表面標記和細胞內蛋白的檢測 | 細胞類型鑒定和免疫表型分析 |
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免疫診斷 |
檢測感染性疾病、腫瘤標志物和藥物測定 | 臨床診斷和疾病監測 |
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藥物研發 |
藥物靶點發現和驗證 | 治療效果評估和新藥研發 |
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研究蛋白結構和功能 |
探索蛋白功能和相互作用 | 揭示蛋白的結構和生物學功能 |
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免疫療法 |
激活或抑制免疫系統的特定分子或細胞 | 癌癥治療和免疫調節 |


