螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Renila luciferase)可分別催化熒光素(luciferin)或腔腸素(coelenterazine)氧化形成oxyluciferin或coelenteramide,并在此過程中產(chǎn)生生物熒光。Double-Luciferase Reporter Assay Kit首先以熒光素為底物檢測(cè)螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因的活性,之后在淬滅該熒光反應(yīng)的同時(shí),以腔腸素為底物檢測(cè)海腎熒光素酶報(bào)告基因的活性,具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣、無(wú)細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。

• 本產(chǎn)品的檢測(cè)靈敏度顯著優(yōu)于市場(chǎng)上同類產(chǎn)品，螢光素酶化學(xué)發(fā)光的信號(hào)穩(wěn)定。

• 本產(chǎn)品發(fā)光強(qiáng)度高于其他品牌。

• 螢火蟲熒光素酶 淬滅效果最佳，遠(yuǎn)超市場(chǎng)上其他品牌，熒光殘留量很少，對(duì)海腎熒光素酶的再發(fā)光幾乎沒有。影響，能提高測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確度，提高數(shù)據(jù)得可重復(fù)性！

• 穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)單，讀數(shù)穩(wěn)定，檢測(cè)速度快。

• miRNA靶基因驗(yàn)證：通過構(gòu)建熒光素酶報(bào)告載體，驗(yàn)證miRNA與其靶基因mRNA或lncRNA的結(jié)合情況。

• 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控驗(yàn)證：將轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)克隆在螢火蟲熒光素酶基因的上游，通過檢測(cè)熒光素酶活性變化來(lái)驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用。

• 啟動(dòng)子分析：將啟動(dòng)子區(qū)域序列克隆在螢火蟲熒光素酶基因的上游，通過檢測(cè)熒光素酶活性來(lái)分析啟動(dòng)子的活性及其在不同條件下的變化。

• 啟動(dòng)子SNP分析：一些基因的啟動(dòng)子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性，可運(yùn)用熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)分析其相對(duì)活性。

Q：試劑盒在使用過程中有哪些注意事項(xiàng)？

A：Luciferase Reaction Buffer Ⅱ在溶解過程中可能有部分沉淀析出，使?前應(yīng)充分需蕩或?qū)⑵渲糜?7℃水浴鍋中，保證其完全溶解后再使用。

Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ反應(yīng)前需平衡至室溫。

為保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，建議測(cè)量大量樣品時(shí)使用排槍添加Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ，使用過程中務(wù)必留意排槍各孔吸取的液體是否一致。

Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ均易發(fā)生氧化反應(yīng)，請(qǐng)合理安排實(shí)驗(yàn)，避免樣品解凍后在室溫下長(zhǎng)時(shí)間放置。