金開瑞酵母雙雜交技術平臺的核心競爭力
擁有較齊全的cDNA文庫,確保篩選出與誘餌蛋白存在特異相互作用的蛋白
由10年從事酵母表達操作的實驗員組成,確保實驗高效準確
創新的三框文庫構建方法,可保證片段長度、陽性率和文庫滴度等信息的一致性。
一站式輔助檢測手段,多重驗證確保實驗結論可靠
高效、可靠的蛋白質互作檢測系統
設計誘餌蛋白(Bait)和獵物蛋白(Prey)的表達載體,選擇合適的酵母菌株和報告基因系統。確定篩選條件和對照實驗方案。
將目標基因克隆到誘餌和獵物載體中,進行測序驗證,確保讀碼框正確,無突變發生。
使用LiAc/PEG方法將構建好的誘餌載體和獵物載體共轉化到酵母感受態細胞中。
在四缺培養基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)上進行篩選,并通過β-半乳糖苷酶活性檢測驗證陽性克隆。
對陽性克隆進行驗證實驗,排除假陽性結果,確保蛋白質互作的特異性。
對實驗結果進行系統分析,構建互作網絡,提供詳細的實驗報告。
根據您的需求選擇最合適的服務類型
| 服務項目 | 應用 | 互補實驗 | 周期 |
|---|---|---|---|
| 酵母雜交文庫構建 | 酵母雜交篩選 | - | 4-6周 |
| 核酵母雙雜交篩選 | 獲得與已知蛋白互作的未知蛋白 | COIP,GST pulldown | 6-8周 |
| 膜酵母雙雜交篩選 | 研究膜蛋白之間的互作 | COIP,GST pulldown | 8-10周 |
| 酵母單/雙雜交驗證 | 已知蛋白與蛋白/啟動子之間的互作 | EMSA,雙熒光素酶等 | 4-5周 |
| 服務項目 | 客戶提供 | 最終交付 |
|---|---|---|
| 文庫構建 | 組織/細胞 | 滴度在1×10cfu/mL以上的酵母文庫菌液;文庫PCR鑒定結果圖片(陽性率在90%左右) |
| 文庫篩選 | 蛋白序列/基因序列/質粒 | 篩選過程中的全部原始圖片;篩選獲得所有相互作用的獵物蛋白的測序結果 |
關于酵母雙雜交服務的疑問解答
酵母雙雜交技術特別適合研究核蛋白和膜蛋白的相互作用。對于核蛋白,我們使用經典酵母雙雜交系統;對于膜蛋白,則采用分離的泛素系統(split-ubiquitin)技術。此外,我們還提供針對不同亞細胞定位蛋白的定制化服務方案。
根據服務類型不同,所需樣品有所區別:
我們的技術支持團隊會在項目啟動前提供詳細的樣品準備指南。
標準服務周期如下:
具體時間會根據項目復雜程度有所調整,加急服務可縮短30%時間。
我們采用多重質控確保結果可靠:
提交咨詢表單,我們的技術專家將在24小時內與您聯系,為您設計最優實驗方案